实验干货 | 三箱社交实验:解码小鼠的"社交密码"
在自闭症谱系障碍的研究中,精准量化模型动物的社交行为是解析疾病机制的关键。三箱社交实验系统正是为此需求设计的标准化行为学评估方案。该实验装置由三个相连的透明箱体构成(左箱/中箱/右箱),通过刺激鼠容器与空容器的对照设计,模拟自然社交场景中的新奇性探索与记忆形成过程
系统组成
1.实验箱体:通常为一个长方形箱体,内部用隔板分为三个相连的独立区域(左箱、中箱、右箱),隔板上有可供小鼠自由穿梭的通道;2.刺激鼠容器:两个相同的金属笼子,用于放置作为社交对象的刺激小鼠(通常为同性、陌生且健康的小鼠);
3.空容器:与刺激鼠容器外观一致,作为对照,内部无小鼠;
4.摄像及分析系统:包括摄像头(用于记录小鼠在三箱中的活动轨迹)和配套的行为分析软件(可自动统计小鼠在各区域的停留时间、穿梭次数等数据)。
使用方法
将实验小鼠放入三箱装置的中箱,让其自由探索整个箱体(左、中、右箱),通常适应10分钟,消除环境陌生感。
在一侧箱体(如左箱)放置装有刺激鼠的容器,另一侧箱体(右箱)放置空容器,中箱为空。将实验小鼠放回中箱,记录其在一定时间内(通常10分钟)在左箱和右箱的停留时间。若实验小鼠在有刺激鼠的箱体停留时间更长,说明其具有正常的社交偏好。
间隔一段时间后,将其中一个空容器更换为新的陌生刺激鼠,原刺激鼠保留在箱体内,作为熟悉刺激鼠,同样记录实验小鼠在装有熟悉刺激鼠和新刺激鼠的箱体中的停留时间。若实验小鼠在新刺激鼠所在箱体停留时间更长,表明其具有社交记忆能力。
核心指标
1.交偏好指数:实验小鼠在有刺激鼠区域的停留时间与在空容器区域停留时间的比值(或差值),比值越高,社交偏好越强;2.社交记忆指数:测试阶段中小鼠在新刺激鼠区域的停留时间与熟悉刺激鼠区域停留时间的比值(或差值),比值高说明社交记忆良好;
3.辅助指标:包括小鼠在各区域的穿梭次数、探索容器的时长(如嗅闻容器的时间)等,可辅助判断小鼠的活动能力和社交兴趣。
注意事项
01.实验动物选择1.刺激鼠需为同性(避免性吸引干扰)、健康且与实验鼠品系一致,年龄、体重相近;
2.实验前需单独饲养刺激鼠,避免其相互熟悉影响实验。
02.环境控制
1.实验箱需清洁消毒(避免残留气味干扰),保持安静、光线适宜(通常为弱光,减少小鼠应激);
2.实验时间固定(如同一时间段进行,避免昼夜节律影响),实验者尽量远离箱体,减少人为干扰。
1.适应阶段确保小鼠充分熟悉环境,否则可能因焦虑导致活动异常;
2.更换刺激鼠或清洁容器时,避免实验鼠看到操作过程,防止应激;
3.每组样本量需足够(通常每组8-12只),以减少个体差异对结果的影响。
04.结果解读
需结合小鼠的总活动量(如穿梭次数)判断,若总活动量过低,可能是因焦虑或健康问题,而非社交能力异常。
文献案例
Gamma Oscillation Dysfunction in mPFC Leads to Social Deficits in Neuroligin 3 R451C Knockin Mice发表于Neuron杂志。该研究旨在探究神经连接素NL3基因突变导致自闭症小鼠社交缺陷的神经机制。
01.实验步骤
1.行为学实验:利用三箱社交实验检测小鼠社交行为。将野生型小鼠和NL3 R451C敲入(KI)小鼠分别放入三箱装置,在一侧箱中放置陌生小鼠,另一侧放置空容器,记录小鼠在各箱停留时间,评估社交偏好;之后再将其中空容器更换为新的陌生小鼠,检测小鼠对新、旧陌生小鼠的社交偏好,判断其社交新奇性,以确定KI小鼠是否存在社交缺陷;
2.电生理记录:采用细胞外电生理记录技术,记录野生型小鼠和KI小鼠内侧前额叶皮层(mPFC)神经元的放电活动,分析神经元的兴奋性变化,以及在社交互动过程中神经元的放电频率和相位编码情况;
02.结果讨论
1.社交缺陷与mPFC异常相关:三箱社交实验结果表明,NL3 R451C KI小鼠存在社交新奇性缺陷,即对新的陌生小鼠缺乏偏好,提示其社交行为异常。电生理记录显示,KI小鼠mPFC中快速放电的抑制性神经元兴奋性降低,且gamma振荡功能失调,同时在社交互动时神经元放电频率和相位编码出现异常,说明mPFC功能障碍与自闭症小鼠的社交缺陷密切相关。
2.光遗传刺激可改善社交缺陷:光遗传学实验发现,以特定频率(40Hz嵌套8Hz)刺激mPFC中的PV神经元,可正向调节小鼠的社交行为,恢复KI小鼠的社交新奇性偏好。这表明通过调节mPFC中PV神经元的活动,能够逆转自闭症小鼠的社交缺陷,为自闭症社交缺陷的治疗提供了潜在的干预靶点和策略。
玉研仪器大小鼠三箱社交系统
玉研仪器提供专业的三箱社交实验系统,包括实验箱、高清摄像头、视频跟踪与分析软件等,能够精准记录动物的行为轨迹和探索时间,自动计算关键数据指标,为三箱社交实验提供高效、可靠的解决方案。01.产品特点
1.专业设计,结果可靠:专为大小鼠实验设计,测试箱使用无毒材质,尺寸设置符合实验动物形态特征,满足实验要求,确保测试结果准确可靠;
2.视频采集,减少干扰:采用视频摄像技术,实现了实验过程的自动化,避免了人工观察引入的主观误差和对实验动物的干扰,增加了实验结果的真实性;
3.自动追踪分析,结果准确:采用视频追踪技术,自动识别实验动物、提取行动轨迹、分析实验参数,使实验结果更加客观准确。
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